尿液常规分析标准化的体会与建议

2018-06-03 02:13

尿液分析是临床检验三大常规之一,广泛应用于临 床,对肾与尿道疾病、肝脏疾病、代谢性疾病(如糖尿 病)的诊断、治疗及疗效监测有重要价值。但尿液分析 的检测项目多,所用器材与方法也多种多样,检测结果 影响因素复杂,这种状况导致尿液分析的误差、室间差 异较大,完全有必要对尿液分析的方法、器材及标本的 采集与运送进行标准化,以减少实验误差,增加室间可 比性,便于质量控制。我们根据多年的临床实践和调查 研究,并复习相关的文献,针对国内现状,对尿液分析 的标准化提出一些建议,供同道们参考、批评、指正。

1.材料与仪器

材料与仪器是尿液分析的物质基础,只有对之进 行标准化,才有真正意义的尿液分析标准化,但实验 工作者在日常工作中最易忽视这一点。一方面是由于 经济方面的原因,因标准化的器材往往比较昂贵;另 一方面是由于不够重视。

首先,用于尿液分析的容器、试管、玻片必须能 进行标记,便于病人的识别,这样可防止标本的混乱。 其次,材料应保持干净,不能附有微粒,减少尿液分 析过程的干扰。

用于离心尿液的离心试管,应满足以下条件:足 够长,防止离心时尿液溢出;干净、透明,便于尿液 外观检查;带体积刻度,刻度精确到 0.1ml;体积大 于 12ml,小于 15ml;试管口密封装置,防止试管内 液体溅出有气溶胶的形成;具有锥形或缩窄的底部, 便于浓缩沉渣;无化学物质污染;最好使用一次性离 心试管。

尿沉渣板的标准化,是尿液沉渣分析标准化的重 要环节,普通玻片上滴沉渣液,再加盖玻片的检查方 法,不能提供标准化的、可重复的结果。建议使用标 准化的尿沉渣板,因其具有标定好的小空间,可容纳 定量的液体,故每次检查的沉渣都是定量的,所以可 提供标准化的结果。但其不可重复使用。

随着尿液分析自动化在全国的普及,尿试条得到 了广泛的使用,但尿试条受影响因素很多,在使用中 应注意以下问题:不可使用已过有效期的试带条,应 将试带条保存在生产厂家提供的容器中,不可更换保 存容器;不可将试带条贮存在阳光直射或潮湿的地 方;贮存试带条的容器应密封,保存温度遵循厂家建 议;每次从装试带条的容器中取出少量的试带条,取 出后立即盖好容器;未用完的试带条不可再放回容器 中;不同容器中的试带条不混用;不可触摸试带条上 的化学反应膜块。

尿液化学分析,每天必须做一次质控,且必须同 时使用高低值两种质控物还必须参加室间质量控制。 质控应为多组分质控物。每更换一盒试带条必须做一 次质控,更换一批试带条,必须对比两批试带条的质 控结果。质控物的值应在实验室所使用方法的可检测 范围之内。

尿液沉渣检查应使用具有内置光源的双筒显微 镜。显微镜应至少具备 40 倍、10 倍的物镜,10 倍目 镜。同一实验室如有多台显微镜,各显微镜的物镜及 目镜的放大倍数应一致。

尿试带条结果判读仪器应为测定反射光的光度 分析仪,它通过测定试带条上反应膜块的反射光来判 读结果。尿试带条结果判读仪器应可在排除其它颜色 的干扰的情况下测量尿试带条上各反应膜块的颜色 变化,并可在特定的时间内判读结果以防结果随时间 而变化。使用仪器前应仔细阅读厂家提供操作指南, 并按仪器的操作指南进行操作,严格执行其提供的质 量保证的措施,并对仪器进行校正。定期对仪器进行 维修,包括光学部分和机械部分。

离心机顶部应有盖,离心时应盖上盖,保证安全。 离心时机内温度应在 15-25℃。离心机相对离心力可 稳定在 400G,并定期对离心机的相对离心力进行校 正。

2.尿液标本的收集及运送

目前,国内尿液标本的收集及运送方面非标准化 现象比较普遍,尿液分析结果的误差很多是来自这一 环节。

首先,在标本的留取环节要注意以下问题:病人 留取尿液标本之前,实验室工作人员、医生或护士必 须对病人进行指导,给病人介绍留取标本的正确方法 及有关注意事项;随机尿液标本、24 小时尿液标本、 时段尿液标本可由病人自己留取,但必须得到实验室 工作人员的指导;导管尿液标本、耻骨上穿刺留取尿 液标本,必须由病人医生或护士的协助下完成;随机 尿液标本的收集无特殊时间规定,但病人必须有足够 的尿量;清晨第一次尿标本,为收集病人起床后第一 次尿液;收集时段尿液标本时应告知病人时间段的起 点和终点,时间段尿液标本应包括该时间段病人排出 的所有尿液;必要时:应告知病人标本保存的注意事 项。

其次,在标本的收集和运送环节应注意:收集和 运送尿液的容器应干净、防漏,并由透明且不与尿液 成分发生反应的惰性材料制成;容器及其密封装置不 带干扰物质;标本收集和运送容器不可重复使用;收 集容器体积大于 50ml,具有直径大于 4.0cm 的圆形 开口,具有较宽的底部;运送容器具有安全稳妥的密 封装置,其密封装置易于操作和开启。

再次,要注意标本的保存。标本保存容器必须标 记、标记内容必须包括:病人的全名,可识别病人的 标本特异性编码,标本收集的时间。标签应贴在容器 上,不可贴在其盖上。尽量不要使用防腐剂。在标本 收集后 2 小时之内无法进行尿液分析,且尿液中所要 分析的成分不稳定,标本可加入特定的化学防腐剂。 尿液分析最好在标本收集后 2 小时完成。要进行多项 分析,尿液应分装,根据不同的分析目的,选择不同 的运送和保存方法。

最后,实验室应建立严格的标本接受制度,工作 人员接受标本时必须检查标本是否合格,检查内容包 括:送检标本的标记内容与医生所填化验单是否一 致;从收集标本到接收标本的时间是否过长;标本容 器是否符合要求;标本是否被污染;标本量是否符合 实验的要求。

3.尿液分析

如尿液有异常的颜色、混浊度、气味,必须向临 床报告。实验室应建立一套描述各种颜色、混浊度、 气味的专用术语。

干化学比色试带条法测定尿比重受尿液酸碱度、 中分子量化合物影响较大。只适用于正常人体检及初 诊病人筛查,应用尿比重判断肾功能时,应使用折射 仪测定法。我们曾用试纸法、比重计法、折射仪法对 508 例尿液尿液标本进行对比检测研究,上述结论正 是来源于此研究。

常规实验室中,尿液的化学检查采用试带条法, 其主要分析内容包括:酮体、白蛋白、葡萄糖、白细 胞脂、血红蛋白、亚硝酸盐、酸碱度、胆红素、尿胆 原。用试带条法进行化学检查的尿液标本最好是未离 心的、混合均匀的、温度在 15-25℃之间的清晨第一 次尿,也可采用随机尿液标本。不同厂家生产用于尿 液化学检查的试带条、同一厂家生产的不同批号的试 带不具有等同性。使用试带条前,要仔细阅读产品说 明书,严格按其说明进行操作。试带条与尿液的反应 时间需严格遵循产品说明书的规定。必须准确掌握试 带条检测每一种成分的敏感度和特异性。试带条的人 工读取有操作者的个体差异。人工读取时,应选择合 适的光源,并让试带条靠近比色卡。多种物质可干扰 试带条与尿液中化学成分的反应,应掌握出现假阴 性、假阳性条件。

试带条检测尿液化学成分的确证试验,是指用不 同于试带条的方法检测对应的化学成分。尿白蛋白的 确证试验为磺基水杨酸法。尿葡萄糖的确证试验为葡 萄糖氧化酶定量法。尿胆红素的确证试验是 Harrison 法。尿白细胞、红细胞的确证试验为尿沉渣显微镜检 查。

尿液沉渣检查的标本以清晨第一次尿标本为最 佳,急诊病人可用随机尿。管型、红细胞、白细胞在 比重小于 1.010 的碱性尿液中容易溶解。尿液在非冷 藏条件放置时间大于 2 小时。则不可用于沉渣检查。 检测标本量为 10ml。标本量小于 10ml,应在结果报 告单中注明。

每个实验室应制定制度,规定每个成员均以同样 的方法和操作步骤进行尿液沉渣检查。尿液标本离心 时间为 5 分钟,相对离心力为 400G 左右。离心后倾 倒完上清液,离心管底部残留的液体的体积就为 0.2ml。尿沉渣检查尽量使用透明的一次性专用塑料 板,以每单位体积多少个沉渣成分报告结果。

尿沉渣检查也可使用载玻片加盖玻片的方法:从 混匀沉渣中取 20ul滴载玻片上,用 18×18mm2 盖片后 镜检。低倍(10×10)全片至少 20 个视野求出一个 视野管型平均值,高倍(40×10)至少 10 个视野各 种细胞的最低到最高。尿结晶以每一高倍视野+、++、 +++、++++报告。但这种方法无法提供标准化的结果。 尿沉渣的检查内容应包括:①细胞成分:红细胞、白 细胞、吞噬细胞、上皮细胞等。②管型:透明管型、 细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、细菌管型、结晶管 型、脂肪管型、混合管型、肾功能不全管型等。③结 晶:无定形结晶、磷酸盐结晶、草酸钙结晶尿酸结晶 等。④细菌、寄生虫、酵母菌。⑤精子、粘液。⑥临 床医生的特殊要求。我们利用双盲法同时对 6349 例 和 1000 例尿液标本分别用四种尿液分析仪和显微镜 检查进行对比分析,结果显示:如果以干化学法检查 结果红细胞、白细胞、尿蛋白及亚硝酸盐都为阴性的 四项指标联合作为过筛镜检的标准,白细胞假阴性仅 为 0.3%(占总检测率 0.15%),红细胞假阴性仅为 0.13%(占总检测率 0.06%),在 360 份含有各类管 型的尿液中,只有 29 例含有 0-1/HP 的透明管型(在 正常参考范围内)的尿液漏检(占总检测率 0.46%), 证实以此作过筛标准是可行的。为此,我们建议:在 临床医生没有特别要求尿液显微镜检查且尿液外观、 浊度正常的情况下,如尿试条结果同时满足:①白细 胞结果为阴性;②亚硝酸盐结果为阴性;③尿蛋白结 果为阴性;④红细胞结果为阴性,可以认为尿液中的 红细胞、白细胞及管型数量在参考范围内,实验室工 作人员可不进行尿液显微镜检查。

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